環(huán)氧-瓊脂糖凝膠FF的使用方法您知道嗎？

環(huán)氧-瓊脂糖凝膠FF是一種將環(huán)氧基團(tuán)鍵合在瓊脂糖微球上形成的活化層析分離介質(zhì)中間體。該產(chǎn)品保留了瓊脂糖的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，與生物活性大分子有很好的相容性，具有高活化基團(tuán)密度，適用于帶適用于氨基、羥基、巰基等基團(tuán)的配基的偶聯(lián)，偶聯(lián)效率高。

技術(shù)指標(biāo)：

使用方法：

　  1. 在配基偶聯(lián)前，準(zhǔn)備好所有的樣品、溶液、緩沖液等，盡量減少每一步操作之間的間隙。

　　2. 偶聯(lián)前用蒸餾水洗滌10個(gè)體積以上，去除保存液。

　　3. 根據(jù)目標(biāo)配基選擇偶聯(lián)溶液體系，一般情況下巰基偶聯(lián)pH為7 ~ 9，氨基偶聯(lián)pH為9 ~ 11，羥基偶聯(lián)pH為＞11。

　　4. 可以在20 ~ 40℃下偶聯(lián)，一般提高溫度能加速偶聯(lián)，在偶聯(lián)效果不好的情況下，可以提高溫度至35℃以上，但要考慮配基的穩(wěn)定性。

　　5. 偶聯(lián)時(shí)間依據(jù)反應(yīng)速度而定，通常可偶聯(lián)過夜（16 h）。

　　6. 偶聯(lián)配基后，剩余環(huán)氧基團(tuán)需要封閉，可用半胱氨酸、乙醇胺、甘氨酸等小分子試劑封閉數(shù)小時(shí)，如0.2 M Na2CO3, 0.1 M 乙醇胺, pH 10，37℃封閉16 h。

　　7. 偶聯(lián)完畢，用pH 8 ~ 9、0.1 mol/LTris-HCl緩沖液和pH 4 ~ 5、0.1 M醋酸-醋酸鈉緩沖液依次沖洗，循環(huán)三遍，去除未偶聯(lián)的殘留配基。

　　8. 偶聯(lián)后的凝膠可保存在含抑菌劑的溶液中，如20%乙醇。

環(huán)氧-瓊脂糖凝膠FF的使用方法您知道嗎？