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上海信帆生物供應(yīng)血管緊張素1放免試劑盒,提供放免檢測服務(wù)

更新時間:2019-12-17      瀏覽次數(shù):973

上海信帆生物供應(yīng)血管緊張素1放免試劑盒,提供放免檢測服務(wù)!該試劑盒樣本收集的時候,請一定加入酶抑制劑,如果要檢測的話,樣本收集好了,請盡快檢測!本公司是提供放免實驗代測服務(wù)的,如果您有不清楚的地方,可以隨時咨詢我們!

 

血管緊張素放免分析試劑盒

125I- Angiotensin Radioimmunoassay Kit

ARIA Kit

原理(Principles

血漿腎素活性(PRA)的測定是以血管緊張素(A)產(chǎn)生的速率來表示的。血漿中加入

酶抑制劑來抑制轉(zhuǎn)化酶和血管緊張素酶的活性,A不再進(jìn)一步降解,使測定結(jié)果準(zhǔn)確。PRA

的測定是取雙份血漿,一份血漿在 37℃溫育一小時,使腎素作用于血管緊張素原產(chǎn)生 A作為

測定管,另一份血漿在 4℃放置作為對照管。應(yīng)用放射免疫分析法 A的濃度減去對照管 A

的濃度,被溫育時間除之,則為單位時間內(nèi) A產(chǎn)生的速率,稱為腎素活性。本分析藥盒標(biāo)記

物為 125I-A,采用免疫分離劑分離,快速﹑方便﹑準(zhǔn)確。

用途(Intended Use

腎素是由腎臟近球體細(xì)胞產(chǎn)生的分子量為 40000 的一種羧基蛋白水解酶。它作用于血管緊

張素原產(chǎn)生血管素(A10 )A在轉(zhuǎn)化酶的作用下形成血管緊張素(A8 肽)。腎素-血

管緊張素系統(tǒng)有多種生理功能。在調(diào)節(jié)人體血壓、水和電解質(zhì)平衡代謝過程中起著重要作用。

另外,它與一些腎臟疾病及與腎臟有關(guān)的一些疾病有密切關(guān)系。

血漿腎素活性(PRA)和 A濃度的測定已成為原發(fā)性和繼發(fā)性高血壓分型診斷、治療及

研究的重要指標(biāo)。對一些有關(guān)腎臟疾病的診斷、治療以及發(fā)病機(jī)理的探討有著重要的意義。

藥盒組成(Components of Kit

1)

A標(biāo)準(zhǔn)品:凍干品,一套共 7 瓶,用 1 mL 溫育液溶解

A

B

C

D

E

F

單位

0

0.2

0.6

1.8

5.4

12

ng/mL

2)

125I-A1 瓶 凍干品,100T 11 mL 溫育液溶解,50T 5.5 mL 溫育液溶解。

標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)記物溶解后分裝–10℃保存可用一個月,避免反復(fù)凍融。

3)

A抗體:

1 瓶 凍干品,100T 12 mL 溫育液溶解,50T 6 mL 溫育液溶解,

4) 溫育液:

1

5) 分離劑:

1 瓶 使用前必須充分搖勻

6) 抗凝劑:

1 瓶 若有晶體析出可加熱溶解

7) 酶抑制劑: 2

正常參考值(Normal Serum values

各實驗室應(yīng)根據(jù)本實驗室條件及接觸人群的不同,建立自己的正常值范圍。

下列數(shù)據(jù)僅供參考:

坐姿: 1.68 ± 1.12 ng/mL注意事項(Attention):血樣的采集和保存

1) 待樣本脈搏穩(wěn)定后,坐姿采集肘靜脈血 2 mL,迅速注入在冰水浴中冷卻的含 20 μL EDTA

試管中,搖勻,放冰水浴中冷卻后,在 1000 轉(zhuǎn)/分離心 5 分鐘( 4℃離心),分離血漿,

取血漿 1 mL 放入另一支已預(yù)冷的含有 10 μL 酶抑制劑 1 20 μL 酶抑制劑 2 的試管中搖勻,

立即測定或置–20℃冰箱保存,可用兩周。

2) 激發(fā)試驗,樣本在基礎(chǔ)狀態(tài)采血后,給肌肉注射速尿(0.7 mg/Kg 體重)??倓┝坎怀^ 50

mg,保持立位不飲水,兩小時后坐姿采血。

注意:注射速尿后兩小時內(nèi)隨尿排出的水電解質(zhì)較多,如樣本血鉀過低,試血前應(yīng)適當(dāng)給

予補(bǔ)充,試驗過程中樣本可能出現(xiàn)口渴、無力、出汗等,一般不重,如過重應(yīng)酌情終止試

驗,讓樣本平臥,并給予糖鹽茶水。

3) β-阻斷劑、血管擴(kuò)張劑、利尿劑及甾體激素、甘草等影響體內(nèi)腎素水平,一般在停藥兩周

后測 PRA,得血平等代謝慢的藥物應(yīng)停藥三周后測定,不適停藥的樣本應(yīng)改服胍乙啶等影

PRA 較小的降壓藥。

4) 鈉攝入量影響機(jī)體 PRA 水平,樣本測定 PRA 三天前應(yīng)適當(dāng)減少鈉鹽攝入量,樣本應(yīng)測定

取血前 24 小時尿鈉的含量,以供分析 PRA 結(jié)果時參考。

操作流程(Assay Procedure

冰凍的血漿樣品在流動的冷水中快速融化,快速取兩份樣品,一份作對照管的放冰水浴中,一

份做測定管的在 37℃水浴中保溫 1 小時,取出后放入冰水浴中。隨后在冰水浴中按下表加樣

單位:μL

T

NSB

標(biāo)準(zhǔn)品

樣品

A

B

C

D

E

F

G

1

2

···

溫育液

200

標(biāo)準(zhǔn)品

100

100

100

100

100

100

100

對照管

100

100

···

測定管

100

100

···

125I-A

100

A抗體

100

搖勻,4℃放 15 小時以上

分離劑

500

充分混勻,室溫放置 15 分鐘后,3500 rpm 離心 20 分鐘

吸去上清液

沉淀計數(shù) 1 分鐘

數(shù)據(jù)處理(Calculation

按常規(guī)方法計算 NSB%B0%、B/B0%

在半對數(shù)坐標(biāo)紙上,以標(biāo)準(zhǔn)品 A濃度為橫坐標(biāo),以 B/B0%為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,根

據(jù)血漿樣品(B/B0%)從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得樣品測定管和對照管相應(yīng)的 A濃度值。

PRA ng/mL/hr = 測定管 A濃度 對照管 A濃度

(當(dāng)血漿 A濃度超過標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍時,應(yīng)將 37℃處理的血漿用溫育液適當(dāng)稀釋后復(fù)測)

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