MMP2/MMP9明膠酶譜法試劑盒細(xì)胞樣本應(yīng)該如何處理：

細(xì)胞樣本用PBS，5倍體積震蕩裂解,估算細(xì)胞的體積，然后加入5倍體積的PBS，渦旋振蕩15-30s,而后靜置或低速離心?；蛘呤謩?dòng)震蕩。

MMP2/MMP9明膠酶譜法試劑盒采用酶譜法(Zymography)檢測MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE 電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測方法，其靈敏度可達(dá)1 nM，高于ELISA方法，其基本原理和程序是：制備加有膠原酶底物的SDS-PAGE 凝膠，含蛋白酶的樣品在此凝膠中進(jìn)行電泳，電泳結(jié)束后取出凝膠與酶反應(yīng)Buffer 孵育，凝膠染色與脫色。凝膠中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶條帶的位置，蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮區(qū)域，從而能同時(shí)指示MMP-2、MMP-9 的大小位置(酶譜)及活性。本試劑盒提供MMP-2、MMP-9 特異蛋白底物及酶學(xué)反應(yīng)緩沖液，可檢測少至0.1~0.5 μl 血液中的MMP-2、MMP-9 酶譜及活性，檢測靈敏度~1nM。試劑盒可進(jìn)行50次標(biāo)準(zhǔn)小膠檢測，如果小膠加樣孔為10~15個(gè)，則總計(jì)可檢測500~750個(gè)樣品。

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